Каталог профилей
InvitroДиагностика гемолитической анемии, ассоциированной с недостаточностью пируваткиназы (экзоны 3, 5, 7, 8, 10, 11 гена PKLR) (Diagnosis of hemolytic anemia associated with pyruvate kinase deficiency (exons 3, 5, 7, 8, 10, 11 of the PKLR gene))
Описание обследования
Метод определенияСеквенирование.
Исследуемый материал
Венозная кровь в вакуумной пробирке с ЭДТА, с фиолетовой крышкой, от 2 мл.
Синонимы: Дифференциальная диагностика гемолитической анемии; Недостаточность пируваткиназы.
Anemia, reticulocytosis.
Краткое описание исследования «Диагностика гемолитической анемии, ассоциированной с недостаточностью пируваткиназы (экзоны 3, 5, 7, 8, 10, 11 гена PKLR)»
Наследственная несфероцитарная гемолитическая анемия вследствие дефицита пируваткиназы – наиболее распространенная среди всех ферментопатий эритроцитов. Фермент пируваткиназа (ПК) необходим для последней ключевой стадии гликолиза – образования енольной формы пирувата и аденозинтрифосфата (АТФ). Недостаточное количество АТФ напрямую влияет на продолжительность жизни эритроцитов, сокращая ее. Наследственная несфероцитарная гемолитическая анемия вследствие дефицита пируваткиназы – наиболее распространенная среди всех ферментопатий эритроцитов. Дефицит ПК является аутосомно-рецессивным заболеванием в результате гомозиготных и компаунд-гетерозиготных мутаций в гене PKLR. Распространенность заболевания выше среди представителей европеоидной расы, особенно в Европе и Северной Америке, и в среднем составляет 5:100 000 (1:20 000).
Клинические проявления дефицита пируваткиназы появляются уже в детском возрасте и включают в себя признаки хронического гемолиза: анемию различной степени тяжести, иктеричность кожных покровов и склер, спленомегалию и/или гепатоспленомегалию. Степень анемии варьирует от легкой или полностью компенсированного гемолиза до тяжелой трансфузионно-зависимой анемии с развитием гиперспленизма, желчекаменной болезни и перегрузки железом. Клинические проявления анемии имеют тенденцию исчезать с возрастом, а течение заболевания часто становится относительно стабильными во взрослом возрасте, хотя в результате стресса, острых инфекций или беременности могут возникать гемолитические кризы, требующие трансфузионной поддержки.
Диагноз дефицита ПК основывается на наличии клинических признаков и симптомов, лабораторных маркеров гемолитической анемии, сниженной ферментативной активности ПК и обнаружении мутаций в гене PKLR.
В общем анализе крови отмечается анемия от легкой до тяжелой степени тяжести (концентрация гемоглобина – 65-110 г/л), с анизоцитозом, пойкилоцитозом эритроцитов, ретикулоцитозом. В тяжелых случаях единичные эритробласты могут наблюдаться в мазке периферической крови как следствие неэффективного эритропоэза. В биохимическом анализе крови отмечаются характерные признаки гемолиза: снижение гаптоглобина, гипербилирубинемия (в среднем, около 60 мкмоль/л), при этом активность ЛДГ, как правило, в норме.
Ферментативная активность ПК обычно определяется в лизатах эритроцитов с помощью спектрофотометрического анализ. В типичных случаях активность фермента у гомозигот составляет менее 25% и у гетерозигот 40-60%.
Идентифицировано более 300 различных мутаций гена PKLR, являющихся причиной хронической гемолитической анемии. Заболевание наследуется аутосомно-рецессивно, в его основе лежат гомозиготные или компаунд-гетерозиготные мутации в гене PKLR. Около 70% составляют миссенс-мутации. За исключением некоторых этнических групп мутации характеризуются большой разнородностью и редко повторяются, примерно у 25% пациентов описывают впервые обнаруженные мутации.
Наиболее распространенными миссенс-мутациями являются 1529G>A в США и Европе, 1456C>T в Южной Европе и 1468C>T в Азии. Другие мутации, в частности, 721G>T и 994G>A, присутствуют у европейцев с меньшей частотой.
Тяжелая гемолитическая анемия развивается при наличии мутаций 994G>A, 1091G>A, 1168G>A, 1594C>T, 1436G>A, 1529G>A.
С какой целью выполняют исследование
Тест используется с целью дифференциальной диагностики гемолитической анемии и анемии, ассоциированной с недостаточностью пируваткиназы.
Литература
1. Банколе А. В., Черняк Е. А. Дефицит пируваткиназы: эпидемиология, молекулярно-генетическая характеристика и современные подходы к диагностике (обзор литературы) //Российский журнал детской гематологии и онкологии. – 2020. – №. 2. – С. 86-93.
2. Бовт Е. А. и др. Дефицит пируваткиназы и несфероцитарная гемолитическая анемия //Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. – 2020. – Т. 19. – №. 3. – С. 121-130.
3. Bianchi P. et al. Addressing the diagnostic gaps in pyruvate kinase deficiency: consensus recommendations on the diagnosis of pyruvate kinase deficiency //American journal of hematology. – 2019. – Т. 94. – №. 1. – С. 149-161.
4. Grace R. F., Barcellini W. Management of pyruvate kinase deficiency in children and adults //Blood, The Journal of the American Society of Hematology. – 2020. – Т. 136. – №. 11. – С. 1241-1249.
